Нейтрофильные лейкоциты крови и клеточного инфильтрата в диагностике активности воспалительного процесса при хроническом эндометрите: проспективное нерандомизированное контролируемое исследование

Введение. Развитие воспалительного процесса проявляется формированием в тканях клеточного инфильтрата, состав которого отражает характер воспаления. При хроническом воспалении в инфильтрате преобладают мононуклеары, однако присутствует то или иное количество нейтрофилов, роль и значение которых не в полной мере охарактеризованы в современной научной литературе.

Цель исследования — установить содержание нейтрофилов в клеточном инфильтрате при различной активности хронического воспаления в эндометрии и оценить зависимость количества этих клеток от функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов периферической крови.

Методы. Дизайн исследования — проспективное нерандомизированное контролируемое. В воспалительном инфильтрате иммуногистохимически определяли количество CD45⁺ лейкоцитов и активированных CD16b⁺ нейтрофилов. С помощью компьютерной морфометрии вычисляли количество этих клеток на 1 мм² площади среза. В венозной крови определяли содержание активированных нейтрофильных лейкоцитов и активность в них НАДФН-оксидазы с помощью теста восстановления нитросинего тетразолия.

Результаты. В исследование включены 40 женщин с хроническим эндометритом (ХЭ) в анамнезе, которые по результатам биопсий эндометрия разделены на две группы: с неактивным течением ХЭ (n = 25) и с активным ХЭ (n = 15). Группу контроля составили 20 женщин без признаков ХЭ. В инфильтрате у женщин с неактивным ХЭ выявлено увеличение количества как CD45⁺ лейкоцитов, так и активированных CD16b⁺ нейтрофилов по сравнению с контрольной группой. При этом в периферической крови отмечено увеличение содержания активированных нейтрофильных лейкоцитов с повышением в них активности НАДФН-оксидазы. Возникновение в тканях эндометрия морфологических признаков обострения ХЭ сопровождалось более выраженным увеличением содержания CD45⁺ и CD16b⁺ клеток в инфильтрате и возрастанием функционально-метаболической активности циркулирующих нейтрофильных лейкоцитов. Между числом активированных нейтрофилов крови и CD16b⁺ нейтрофилов в эндометрии, а также между активностью НАДФН-оксидазы нейтрофилов крови и содержанием CD16b⁺ клеток в инфильтрате выявлена сильная прямая корреляционная связь.

Заключение. Появление в эндометрии даже минимальных морфологических признаков обострения воспалительного процесса сопровождается возрастанием в инфильтрате не только общего количества CD45⁺ лейкоцитов, но и активированных CD16b⁺ нейтрофилов. Изменение функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов периферической крови взаимосвязано с клеточным составом воспалительного инфильтрата и отражает характер течения хронического воспаления в эндометрии.

1. Mortaz E., Alipoor S.D., Adcock I.M., Mumby S., Koenderman L. Update on Neutrophil Function in Severe Inflammation. Front. Immunol. 2018; 9: 2171. DOI: 10.3389/fimmu.2018.02171

2. Kubes P. The enigmatic neutrophil: what we do not know. Cell Tissue Res. 2018; 371(3): 399–406. DOI: 10.1007/s00441-018-2790-5

3. De Filippo K., Rankin S.M. The Secretive Life of Neutrophils Revealed by Intravital Microscopy. Front. Cell Dev. Biol. 2020; 8: 603230. DOI: 10.3389/fcell.2020.603230

4. Garley M., Jabłońska E. Heterogeneity Among Neutrophils. Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz). 2018; 66(1): 21–30. DOI: 10.1007/s00005-017-0476-4

5. Silvestre-Roig C., Fridlender Z.G., Glogauer M., Scapini P. Neutrophil Diversity in Health and Disease. Trends. Immunol. 2019; 40(7): 565–583. DOI: 10.1016/j.it.2019.04.012

6. Yang F., Feng C., Zhang X., Lu J., Zhao Y. The Diverse Biological Functions of Neutrophils, Beyond the Defense Against Infections. Inflammation. 2017; 40(1): 311–323. DOI: 10.1007/s10753-016-0458-4

7. Miller D., Motomura K., Garcia–Flores V., Romero R., Gomez-Lopez N. Innate Lymphoid Cells in the Maternal and Fetal Compartments. Front. Immunol. 2018; 9: 2396. DOI: 10.3389/fimmu.2018.02396

8. Diao L., Cai S., Huang C., Li L., Yu S., Wang L., Liu S., Li Y., Zeng Y. New endometrial immune cell-based score (EI-score) for the prediction of implantation success for patients undergoing IVF/ICSI. Placenta. 2020; 99: 180–188. DOI: 10.1016/j.placenta.2020.07.025

9. James-Allan L.B., Buckley R.J., Whitley G.S., Cartwright J.E. The phenotype of decidual CD56+ lymphocytes is influenced by secreted factors from decidual stromal cells but not macrophages in the first trimester of pregnancy. J. Reprod. Immunol. 2020; 138: 103082. DOI: 10.1016/j.jri.2020.103082

10. Толибова Г.Х., Траль Т.Г., Айламазян Э.К., Коган И.Ю. Молекулярные механизмы циклической трансформации эндометрия. Журнал акушерства и женских болезней. 2019; 68(1); 5–12. DOI: 10.17816/JOWD6815-12

11. Liu H., Huang X., Mor G., Liao A. Epigenetic modifications working in the decidualization and endometrial receptivity. Cell Mol. Life Sci. 2020; 77(11): 2091–2101. DOI: 10.1007/s00018-019-03395-9

12. Пономаренко К.Ю. Рецептивность эндометрия у женщин с нарушениями в репродуктивной системе. Журнал акушерства и женских болезней. 2017; 66(4): 90–97. DOI: 10.17816/JOWD66490-97

13. Kimura F., Takebayashi A., Ishida M., Nakamura A., Kitazawa J., Morimune A., Hirata K., Takahashi A., Tsuji S., Takashima A., Amano T., Tsuji S., Ono T., Kaku S., Kasahara K., Moritani S., Kushima R., Murakami T. Review: Chronic endometritis and its effect on reproduction. J. Obstet. Gynaecol. Res. 2019; 45(5): 951–960. DOI: 10.1111/jog.13937

14. Чуприненко Л.М., Славинский А.А., Севостьянова Е.С., Веревкин А.А., Друшевская В.Л., Котов В.С., Крутова В.А. Экспрессия сосудистого эндотелиального фактора роста типа A в эндометрии при маточной форме бесплодия. Кубанский научный медицинский вестник. 2020; 27(1): 85–95. DOI: 10.25207/1608-6228-2020-27-1-85-95

15. Лихачева В.В., Зорина В.Н., Третьякова Я.Н., Баженова Л.Г., Третьякова Т.В., Ренге Л.В. Современные представления о патогенезе хронического эндометрита. Российский вестник акушера-гинеколога. 2017; 17(4): 25–32. DOI: 10.17116/rosakush201717425-32

16. Moreno I., Cicinelli E., Garcia-Grau I., Gonzalez-Monfort M., Bau D., Vilella F., De Ziegler D., Resta L., Valbuena D., Simon C. The diagnosis of chronic endometritis in infertile asymptomatic women: a comparative study of histology, microbial cultures, hysteroscopy, and molecular microbiology. Am. J. Obstet. Gynecol. 2018; 218(6): 602.e1–602.e16. DOI: 10.1016/j.ajog.2018.02.012

17. Moreno I., Simon C. Relevance of assessing the uterine microbiota in infertility. Fertil. Steril. 2018; 110(3): 337–343. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2018.04.041

18. Berbic M., Ng C.H., Fraser I.S. Inflammation and endometrial bleeding. Climacteric. 2014; 17 Suppl 2: 47–53. DOI: 10.3109/13697137.2014.963964

19. Patel K.R., Roberts J.T., Barb A.W. Multiple Variables at the Leukocyte Cell Surface Impact Fc γ Receptor-Dependent Mechanisms. Front. Immunol. 2019; 10: 223. DOI: 10.3389/fimmu.2019.00223

20. Vitagliano A., Saccardi C., Noventa M., Di Spiezio Sardo A., Saccone G., Cicinelli E, Pizzi S, Andrisani A, Litta PS. Effects of chronic endometritis therapy on in vitro fertilization outcome in women with repeated implantation failure: a systematic review and meta-analysis. Fertil. Steril. 2018; 110(1): 103–112.e1. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2018.03.017

21. Kitaya K., Takeuchi T., Mizuta S., Matsubayashi H., Ishikawa T. Endometritis: new time, new concepts. Fertil. Steril. 2018; 110(3): 344–350. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2018.04.012

22. Оразов М.Р., Радзинский В.Е., Волкова С.В., Хамошина М.Б., Михалева Л.М., Абитова М.З., Шустова В.Б. Хронический эндометрит у женщин с эндометриоз-ассоциированным бесплодием. Гинекология. 2020; 22(3): 15–20. DOI:10.26442/20795696.2020.3.200174

23. Liu Y., Chen X., Huang J., Wang C.C., Yu M.Y., Laird S., Li T.C.. Comparison of the prevalence of chronic endometritis as determined by means of different diagnostic methods in women with and without reproductive failure. Fertil. Steril. 2018; 109(5): 832–839. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2018.01.022. Erratum in: Fertil. Steril. 2019; 111(2): 411.

24. Vicetti Miguel R.D., Chivukula M., Krishnamurti U., Amortegui A.J., Kant J.A., Sweet R.L., Wiesenfeld H.C., Phillips J.M., Cherpes T.L. Limitations of the criteria used to diagnose histologic endometritis in epidemiologic pelvic inflammatory disease research. Pathol. Res. Pract. 2011; 207(11): 680–685. DOI: 10.1016/j.prp.2011.08.007

25. Therrien A., Chapuy L., Bsat M., Rubio M., Bernard G., Arslanian E., Orlicka K., Weber A., Panzini B.P., Dorais J., Bernard E.J., Soucy G., Bouin M., Sarfati M. Recruitment of activated neutrophils correlates with disease severity in adult Crohn’s disease. Clin. Exp. Immunol. 2019; 195(2): 251–264. DOI: 10.1111/cei.13226

26. Nguyen G.T., Green E.R., Mecsas J. Neutrophils to the ROScue: Mechanisms of NADPH Oxidase Activation and Bacterial Resistance. Front. Cell. Infect. Microbiol. 2017; 7: 373. DOI: 10.3389/fcimb.2017.00373